[生物化学实验] 醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质 实验报告下载

weixin_39821526 2020-08-28 08:00:38
[目录]
一、实验目的
二、实验原理
三、实验器材
四、实验试剂
五、实验操作
六、实验数据
七、实验讨论与总结

[原文]
一、实验目的
掌握醋酸纤维薄膜电泳法分离蛋白质的原理和方法
二、实验原理
蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳法将它们分离。
血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁
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[目录] 一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材 四、实验试剂 五、实验操作 六、实验数据 七、实验讨论与总结 [原文] 一、实验目的 掌握醋酸纤维薄膜电泳分离蛋白质的原理和方 二、实验原理 蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质为正离子,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质为负离子,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中,所带净电荷不同,故可利用电泳将它们分离血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白等,各种蛋白质由于氨基酸祖坟、立体构象、相对分子质量、等电点及形状不同,在电场中迁移速度不同。由表可知,血清中5种蛋白质的等电点大部分低于pH值7.0,所以在pH8.6的缓冲液中,它们都电离成负离子,在电场中向阳极移动。 在一定范围内,蛋白质的含量与结合的燃染料量成正比,故可将蛋白质区带剪下,分别用0.4mol/L NaOH溶液浸洗下来,进行比色,测定其相对含量。也可以将染色后的薄膜直接用光密度计扫描,测定其相对含量。 肾病、弥漫性肝损害、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤、慢性炎症、妊娠等都可以使白蛋白下降。肾病时α1、α2、β球蛋白升高,γ-球蛋白降低。肝硬化时α2、β-球蛋白降低,而α1、γ-球蛋白升高。 三、实验器材 1、醋酸纤维薄膜(2cm*8cm,厚度120μm) 2、人血清; 3、烧杯及培养皿 数只; 4、点样器; 5、竹镊子; 6、玻璃棒; 7、电吹风; 8、试管 六只; 9、恒温水浴锅; 10、电泳槽; 11、直流稳压电泳仪; 12、7220型分光光度计; 13、剪刀

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